金年会金字招牌诚信至上的Matrigel基质具有明显的色差变化,从淡黄色到深红色。这种变化是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的,但当与5% CO2达到平衡后,色差会明显减少。在使用前,将冻融后的Matrigel轻轻摇晃试剂瓶,以确保其均匀分散。所有操作需在无菌环境下进行,试剂瓶瓶盖可用70%乙醇擦拭并自然干燥。为确保Matrigel处于均匀状态,应使用预冷的移液器。细胞可以在0.5mm厚的Matrigel基质层表面生长,或在1mm厚的三维Matrigel基质内生长。
需要注意的是,过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层,这种层可以用于细胞贴壁,但不适用于细胞的分化研究。对于冻融后的Matrigel,您可以将其分装在多个预冷的冻存管中,并迅速冷冻保存,以避免多次冻融造成的不良影响。Matrigel在22-35℃的环境中会迅速成胶,因此在4℃下溶解时需进行过夜冻融处理(在4℃时会随着温度的上升而部分成胶)。在使用所有用品之前,务必将其置于冰浴中,且必须使用预冷的移液管、吸头和小管进行Matrigel操作。
成胶后的Matrigel可以在24-48小时后重新呈液态。推荐的包被和成胶方法如下:
一、薄胶成胶方法:
1. 冻融后,使用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质,确保其均匀。
2. 将需要使用的培养板置于冰上,加入浓度为50μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
3. 在37℃下放置30分钟,即可使用。
二、厚胶成胶方法:
1. 冻融后,使用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质,确保其均匀。
2. 将需要使用的培养板置于冰浴,将培养的细胞与Matrigel基质混合,使其顺利悬浮在基质中,加入浓度为150-200μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
3. 在37℃下放置30分钟后,Matrigel即可成胶。可将细胞与培养基质混合或直接让细胞生长在胶表面。
三、薄层包被方法:
1. 冻融后,使用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质,确保其均匀。
2. 根据使用需要,采用无血清培养基稀释Matrigel基质,确定最佳包被浓度。
3. 将稀释后的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中,包被量需至少覆盖整个生长表面,室温下孵育1小时。
冷链操作及产品的合理使用能够有效提高实验的成功率,金年会金字招牌诚信至上始终致力于为科研工作提供高效、稳定的产品支持,确保实验结果的可靠性。